Arthritis verursacht augenblicklich den Abbau von Kollagen Typ I und Typ II bei Patienten mit früher rheumatoider Arthritis: eine Längsschnittanalyse | Annalen der rheumatischen Erkrankungen

METHODEN

Patienten

Wir untersuchten Patienten, die an der COBRA-Studie teilnahmen. COBRA war eine 56-wöchige multizentrische klinische Studie, die zufällig 155 Patienten zuordnete, die die Kriterien des American College of Rheumatology für rheumatoide Arthritis erfüllten.8,9 Alle Patienten hatten eine frühe aktive Erkrankung (weniger als zwei Jahre, median vier Monate). Keiner der Patienten war zuvor mit krankheitsmodifizierenden Antirheumatika (DMARDs) behandelt worden. Eine Gruppe wurde mit einer Kombination aus Sulfasalazin, Methotrexat und anfänglich hochdosiertem oralem Prednisolon (COBRA-Regime) behandelt; Die andere Gruppe wurde mit Sulfasalazin allein behandelt. Die Prednisolon-Dosis betrug in den ersten zwei Wochen 60 mg / Tag und verjüngte sich in wöchentlichen Schritten auf die Erhaltungsdosis von 7,5 mg / Tag in Woche 7. Prednisolon und Methotrexat wurden verjüngt und nach Wochen 28 bzw. 40 gestoppt, während Sulfasalazin fortgesetzt wurde.

Nicht nüchterne Urinproben am zweiten Morgen wurden zu Studienbeginn, drei Monate, sechs Monate, neun Monate und am Ende der Studie erhalten und bei -20 ° C eingefroren gehalten.

Der aktuelle Bericht basiert auf den 110 Patienten, die sowohl zu Studienbeginn als auch bei mindestens einem Follow-up-Besuch Urin zur Verfügung hatten, bestehend aus 52 mit COBRA und 58 mit Sulfasalazin behandelten Patienten. Während und nach der Studie wurden geschwollene und empfindliche Gelenkzählungen sowie eine Bewertung des globalen Wohlbefindens (visuelle Analogskala) und der Westergren-Erythrozytensedimentationsrate (ESR) durchgeführt. Die Krankheitsaktivität wurde als 28 Joint Disease Activity Score (DAS28) ausgedrückt, ein validierter Index, der sich aus einer 28-Gelenkschwellung und -empfindlichkeit, einem Akutphasenreaktanten (ESR) und einem Maß für das globale Wohlbefinden zusammensetzte (10 cm visuelle Analogskala).

Das C-terminale vernetzende Telopeptid von Typ-I-Kollagen (CTX-I) wurde mit dem Crosslaps enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA) (Nordic Biosciences, Herlev, Dänemark) gemessen. Dieser Test verwendet ein polyklonales Antiserum, das gegen β-isomerisierte EKAH β DGGR-Sequenz des C-Telopeptids von α1-Ketten von menschlichem Typ-I-Kollagen angehoben wurde. Intra-Assay- und Interassay-Variationskoeffizienten betragen weniger als 6% bzw. 9%.

Urinary C-terminal cross linking telopeptide of type II collagen (CTX-II) wurde durch einen kompetitiven ELISA (Scaps, Nordic Biosciences) auf Basis eines monoklonalen Maus-Antikörpers gemessen, der gegen die EKGPDP-Sequenz von humanem Typ-II-Kollagen-C-Telopeptid angehoben wurde. Diese Sequenz, in der der Lysinrest (K) an der Vernetzung zwischen Kollagenmolekülen vom Typ II beteiligt ist, ist im reifen Gelenkkollagennetzwerk vorhanden, das von Chondrozyten produziert wird. Daher wird angenommen, dass der Nachweis dieser Sequenz im Urin spezifisch den Abbau reifer Typ-II-Kollagenmoleküle widerspiegelt.

Intra-Assay- und Interassay-Variationskoeffizienten sind kleiner als 8% bzw. 10%. Der durchschnittliche intraindividuelle Variationskoeffizient über 24 Stunden, der die tägliche Variabilität widerspiegelt, betrug nur 15%.

Die CTX-I- und CTX-II-Spiegel im Urin wurden durch die Kreatinin (Cr) -Konzentration im Urin korrigiert, die mit einer standardkolorimetrischen Methode gemessen wurde. Alle Messungen von CTX-I und CTX-II wurden in einem Zentrallabor (Synarc, Lyon, Frankreich) durchgeführt.

Keiner der Patienten litt an einer ausgeprägten Leber- oder Nierenfunktionsstörung, die die Harnspiegel von CTX-I oder CTX-II.

Statistische Analyse

Die CTX-I- und CTX-II-Spiegel wurden logarithmisch transformiert, da beide Variablen zu allen Zeitpunkten eine schiefe Verteilung aufwiesen.

Longitudinale Datenanalyse

Longitudinale Datensätze zeichnen sich durch Beobachtungen mit einer hohen Variabilität zwischen Patienten und einer eher geringen Variabilität innerhalb von Patienten aus. Die hohe patienteninterne Korrelation bedeutet, dass longitudinale Beziehungen nicht mit gewöhnlichen Regressionsmethoden analysiert werden können. GEE (generalised estimating equations) ist eine Regressionstechnik zur Untersuchung intervariabler Beziehungen in Längsschnittstudien; Es berücksichtigt Zeit sowie zeitunabhängige und zeitabhängige Kovariaten.10 Die Vorteile von GEE gegenüber herkömmlichen Methoden bestehen darin, dass GEE alle verfügbaren Längsschnittdaten verwendet, eine ungleiche Anzahl wiederholter Messungen und ungleiche Zeitintervalle ermöglicht und keine multivariate Normalität der Ergebnisvariablen erfordert. GEE erfordert eine a priori “funktionierende” Korrelationsstruktur, um sich an die Korrelation innerhalb des Subjekts anzupassen, die in wiederholten Messdesigns arbeitet. Eine Korrelationsstruktur muss auf Basis des tatsächlichen Datensatzes gewählt werden. In dieser Studie war die “austauschbare” Korrelationsstruktur für alle Ergebnismaße geeignet, da in der Korrelationsmatrix alle Korrelationen zu verschiedenen Zeitpunkten ungefähr gleich waren (Spearman-Korrelationskoeffizienten für CTX-I und CTX-II unterschieden sich zwischen 0,45 und 0,60).

Modellbau

Die Wirkung der Zeit auf CTX-I und CTX-II

Wir haben zunächst versucht, den Verlauf von CTX-I und CTX-II in der Zeit mathematisch zu beschreiben, indem wir die Beziehung zwischen CTX-I / CTX-II und der Zeit untersuchten und anschließend Zeit2 und Zeit3 addierten, um die Anpassung des Modells zu erhöhen (Modell 1).

Baseline-Faktoren (zeitunabhängig)

Anschließend untersuchten wir, ob Variablen, von denen bekannt ist, dass sie das radiologische Ergebnis vorhersagen (Behandlung, Rheumafaktor-Status, Baseline-Schaden), signifikant zur Erklärung der Varianz beitrugen (Modell 2).

Longitudinale Faktoren (zeitabhängig)

Anschließend fügten wir dem Modell 3 Variablen hinzu, die das Ausmaß der klinisch wahrnehmbaren Arthritis widerspiegeln, um die longitudinale Beziehung zwischen Arthritis und CTX-I / CTX-II (Modell 3) zu untersuchen. Dieses Modell wurde mehrmals ausgeführt, jedes Mal mit einer anderen Variablen, die Arthritis widerspiegelt.

Autoregressive Analyse

Wir fügten dann zu Modell 3 die Niveaus von CTX-I / CTX-II hinzu, die einen Zeitpunkt früher (drei Monate) gemessen wurden (CTX-It-3 Monate, CTX-IIt-3 Monate), um zu untersuchen, ob die in Modell 3 gefundenen Beziehungen eine longitudinale Interpretation rechtfertigten.

Zeitverzögerungsanalyse

Diese Analyse wurde durchgeführt, um die zeitliche Beziehung zwischen Arthritis und CTX-I / CTX-II. In Modell 4 wurden die gleichzeitigen Bewertungen von Arthritis durch Bewertungen von Arthritis ersetzt drei Monate oder sechs Monate zuvor. Die Korrelationen zwischen Arthritis-Variablen (ESR, Swollen Joint count, Tender Joint Count, DAS28) und CTX-I oder CTX-II wurden unter Verwendung standardisierter Regressionskoeffizienten verglichen. Ein standardisierter Regressionskoeffizient beschreibt die Beziehung zwischen einer standardisierten (normalisierten) unabhängigen Variablen (hier die Variablen, die Arthritis widerspiegeln) und der abhängigen Variablen (hier CTX-I oder CTX-II) und kann verwendet werden, um Korrelationen zwischen verschiedenen unabhängigen Variablen und einer abhängigen Variablen zu gewichten.