Artrit orsakar omedelbart kollagen typ i och typ II nedbrytning hos patienter med tidig reumatoid artrit: en longitudinell analys / Annaler av reumatiska sjukdomar
metoder
patienter
vi undersökte patienter som deltog i COBRA-studien. COBRA var en 56 veckors multicenter klinisk studie som slumpmässigt tilldelade 155 patienter som uppfyllde American College of Rheumatology kriterier för reumatoid artrit.8,9 alla patienter hade tidig aktiv sjukdom (mindre än två år, median fyra månader). Ingen av patienterna hade tidigare behandlats med sjukdomsmodifierande antireumatiska läkemedel (DMARDs). En grupp behandlades med en kombination av sulfasalazin, metotrexat och initialt högdos oral prednisolon (COBRA-regim); den andra gruppen behandlades med enbart sulfasalazin. Prednisolondosen var 60 mg / dag under de första två veckorna och avsmalnade i veckovisa steg till underhållsdosen på 7, 5 mg/dag i Vecka 7. Prednisolon och metotrexat avsmalnades och stoppades efter vecka 28 respektive 40, medan sulfasalazin fortsatte.
icke-fastande andra morgonen tomrum urinprover erhölls vid baslinjen, tre månader, sex månader, nio månader och i slutet av studien och hölls frysta vid -20 C.
den aktuella rapporten är baserad på de 110 patienter som hade urin tillgänglig vid både baslinjen och minst ett uppföljningsbesök, bestående av 52 COBRA-behandlade och 58 sulfasalazinbehandlade patienter. Under och efter försöket genomfördes svullna och ömma gemensamma räkningar samt en bedömning av globalt välbefinnande (visuell analog skala) och Westergren erytrocytsedimenteringshastighet (ESR). Sjukdomsaktivitet uttrycktes som 28 joint disease activity score (DAS28), ett validerat index bestående av 28 ledsvullnad och ömhet, en akut fasreaktant (ESR) och ett mått på globalt välbefinnande (10 cm visuell analog skala).
urin C-terminal tvärbindningstelopeptid av typ i-kollagen (CTX-I) mättes med Crosslaps enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) (Nordic Biosciences, Herlev, Danmark). Denna analys använder ett polyklonalt antiserum som höjs mot Ekah-isomeriserad Ekah-dggr-sekvens av C-telopeptiden för 6-kedjor av humant kollagen av typ I. Intra-analys och interassay variationskoefficienter är mindre än 6% respektive 9%.
urin C-terminal tvärbindningstelopeptid av typ II-kollagen (CTX-II) mättes med en konkurrenskraftig ELISA (Cartilaps, Nordic Biosciences) baserad på en monoklonal antikropp från mus upphöjd mot EKG-DP-sekvensen av humant typ II-kollagen C-telopeptid. Denna sekvens, i vilken lysinresten (K) deltar i tvärbindning mellan kollagenmolekyler av typ II, är närvarande i det mogna artikulära kollagennätverket producerat av kondrocyter. Sålunda anses detektion av denna sekvens i urin specifikt återspegla nedbrytningen av mogna kollagenmolekyler av typ II.
Intra-analys och interassay variationskoefficienter är mindre än 8% respektive 10%. Den genomsnittliga intraindividuella variationskoefficienten över 24 timmar, vilket återspeglade dygnsvariationen, var endast 15%.
urin CTX-i-och CTX-II-nivåer korrigerades med urinkreatinin (Cr) – koncentrationen mätt med en standardkolorimetrisk metod. Alla mätningar av CTX-i och CTX-II utfördes i ett centralt laboratorium (Synarc, Lyon, Frankrike).
ingen av patienterna led av markant nedsatt lever-eller njurfunktion som kan ha påverkat urinnivåerna av CTX-i eller CTX-II.
statistisk analys
CTX-i-och CTX-II-nivåerna transformerades logaritmiskt, eftersom båda variablerna hade en skev fördelning vid alla tidpunkter.
longitudinell dataanalys
longitudinella dataset kännetecknas av observationer med hög variation mellan patienter och en ganska låg variation inom patienter. Den höga korrelationen inom patienten innebär att longitudinella relationer inte kan analyseras med vanliga regressionsmetoder. Gee (generalised estimating equations) är en regressionsteknik för att studera intervariabla relationer i longitudinella studier; det tar tid, såväl som tidsoberoende och tidsberoende kovariater i beaktande.10 fördelarna med GEE jämfört med vanliga metoder är att GEE använder alla tillgängliga longitudinella data, tillåter ojämnt antal upprepade mätningar och ojämna tidsintervall och kräver inte multivariat normalitet för resultatvariabeln. GEE kräver en a priori” fungerande ” korrelationsstruktur för att justera för korrelationen inom ämnet som fungerar i upprepade mätdesigner. En korrelationsstruktur måste väljas utifrån den faktiska datamängden. I denna studie var den “utbytbara” korrelationsstrukturen lämplig för alla resultatmått, eftersom i korrelationsmatrisen var alla korrelationer vid olika tidpunkter ungefär lika (Spearman korrelationskoefficienter för CTX-i och CTX-II skilde sig mellan 0,45 och 0,60).
modellbyggnad
effekten av tid på CTX-i och CTX-II
vi försökte först beskriva CTX-I och CTX-II i tid matematiskt genom att undersöka förhållandet mellan CTX-i/CTX-II och tid och därefter lägga till time2 och time3 för att öka modellens passform (modell 1).
Baslinjefaktorer (tidsoberoende)
vi undersökte därefter om variabler som är kända för att vara prediktiva för radiografiskt resultat (behandling, reumatoid faktorstatus, baslinjeskada) bidrog signifikant till att förklara varians (modell 2).
longitudinella faktorer (tidsberoende)
vi lade sedan till variabler som återspeglar omfattningen av kliniskt märkbar artrit till modell 3 för att undersöka det longitudinella förhållandet mellan artrit och CTX-i/CTX-II (modell 3). Denna modell kördes flera gånger, varje gång med en annan variabel som återspeglar artrit.
Autoregressiv analys
vi lade sedan till modell 3 nivåerna av CTX-i/CTX-II som mättes en tidpunkt tidigare (tre månader) (CTX-It-3 månader, CTX-IIT-3 månader) för att undersöka om relationerna i modell 3 motiverade en longitudinell Tolkning.
tidsfördröjningsanalys
denna analys kördes för att undersöka det temporala förhållandet mellan artrit och CTX-i/CTX-II. i Modell 4 ersattes de samtidiga bedömningarna av artrit med bedömningar av artrit tre månader eller sex månader tidigare. Korrelationerna mellan variabler av artrit (ESR, svullna ledantal, tender joint count, DAS28) och CTX-i eller CTX-II jämfördes med hjälp av standardiserade regressionskoefficienter. En standardiserad regressionskoefficient beskriver förhållandet mellan en standardiserad (normaliserad) oberoende variabel (här, variablerna som återspeglar artrit) och den beroende variabeln (här, CTX-i eller CTX-II) och kan användas för att väga korrelationer mellan olika oberoende variabler och en beroende variabel.
