Niveltulehdus aiheuttaa välittömästi tyypin I ja tyypin II kollageenin hajoamista potilailla, joilla on varhainen nivelreuma: Pitkittäinen analyysi | aikakirjat reumasairauksien

menetelmät

potilaat

tutkimme Cobra-tutkimukseen osallistuneita potilaita. COBRA oli 56 viikkoa kestänyt kliininen monikeskustutkimus, johon satunnaistettiin 155 potilasta, jotka täyttivät American College of Rheumatology-kriteerit nivelreuman hoidossa.8, 9 kaikilla potilailla oli varhainen aktiivinen sairaus (alle kaksi vuotta, mediaani neljä kuukautta). Yhtäkään potilaista ei ollut aiemmin hoidettu taudin kulkuun vaikuttavilla reumalääkkeillä (DMARD). Yhtä ryhmää hoidettiin sulfasalatsiinin, metotreksaatin ja aluksi suuriannoksisen prednisolonin (COBRA-hoito) yhdistelmällä; toista ryhmää hoidettiin pelkällä sulfasalatsiinilla. Kahden ensimmäisen viikon aikana prednisoloniannos oli 60 mg/vrk, ja viikottain se kapeni ylläpitoannokseen 7, 5 mg/vrk viikolla 7. Prednisoloni väheni ja metotreksaatti lopetettiin viikkojen 28 ja 40 jälkeen, kun taas sulfasalatsiinia jatkettiin.

toisen aamun paastoamatta otetut virtsanäytteet otettiin lähtötilanteessa, kolme kuukautta, kuusi kuukautta, yhdeksän kuukautta ja tutkimuksen lopussa, ja ne säilytettiin pakastettuina -20°C: ssa.

tämänhetkinen raportti perustuu niihin 110 potilaaseen, joilla oli virtsaa saatavilla sekä lähtötilanteessa että vähintään yhdellä seurantakäynnillä. Tutkimuksen aikana ja sen jälkeen tehtiin turvonneet ja arat nivellaskelmat sekä globaalin hyvinvoinnin arviointi (visual analogue scale) ja Westergren erytrosyte sedimentation rate (ESR). Taudin aktiivisuus ilmaistiin 28 nivelvaivojen aktiivisuuden pisteytyksenä (DAS28), joka on validoitu indeksi, joka koostuu 28 nivelen turpoamisen ja arkuuden määrästä, akuutin vaiheen reaktantista (ESR) ja maailmanlaajuisen hyvinvoinnin mittaamisesta (10 cm: n visuaalinen analogiasteikko).

tyypin I kollageenin C-terminaalista ristisilloitettua telopeptidia (CTX-I) mitattiin Crosslaps-entsyymi-immunosorbenttimäärityksellä (Elisa) (Nordic Biosciences, Herlev, Tanska). Tässä määrityksessä käytetään polyklonaalista antiseerumia, joka on kohotettu ihmisen tyypin I kollageenin α1-ketjujen C-telopeptidin β-isomeroitunutta EKAH β dggr-sekvenssiä vastaan. Määrityksen sisäinen variaatiokerroin on alle 6% ja määritysten välinen variaatiokerroin alle 9%.

tyypin II kollageenin C-terminaalista ristisilloitettua telopeptidia (CTX-II) mitattiin kilpailevalla ELISA-testillä (Cartilaps, Nordic Biosciences), joka perustui hiiren monoklonaaliseen vasta-aineeseen, joka nousi ihmisen tyypin II Kollageeni C-telopeptidin EKG-sekvenssiä vastaan. Tämä sekvenssi, jossa lysiinijäämä (K) osallistuu tyypin II kollageenimolekyylien ristisilloitukseen, on läsnä kondrosyyttien tuottamassa kypsässä nivelrikon kollageeniverkossa. Näin ollen tämän sekvenssin toteamisen virtsasta katsotaan nimenomaan kuvastavan kypsien tyypin II kollageenimolekyylien hajoamista.

määrityksen sisäinen variaatiokerroin on alle 8% ja määritysten välinen variaatiokerroin alle 10%. Keskimääräinen yksilöllinen vaihtelukerroin 24 tunnin aikana, joka heijastaa vuorokausivaihtelua, oli vain 15 prosenttia.

virtsan CTX-I-ja CTX-II-pitoisuudet korjattiin virtsan kreatiniinipitoisuudella (CR), joka mitattiin tavanomaisella kolorimetrisellä menetelmällä. Kaikki CTX-I: n ja CTX-II: n mittaukset tehtiin keskuslaboratoriossa (Synarc, Lyon, Ranska).

yhdelläkään potilaista ei ollut merkittävää maksan tai munuaisten vajaatoimintaa, joka olisi voinut vaikuttaa CTX-I: n tai CTX-II: n pitoisuuksiin virtsassa.

tilastollinen analyysi

CTX-I: n ja CTX-II: n pitoisuudet muuttuivat logaritmisesti, koska molempien muuttujien jakauma oli kaikissa ajankohdissa vääristynyt.

Pitkittäistietoanalyysi

Pitkittäistietojoukoille on ominaista havaintojen suuri vaihtelu potilaiden välillä ja melko pieni vaihtelu potilaiden sisällä. Suuri potilaan sisäinen korrelaatio tarkoittaa, että pitkittäisiä suhteita ei voida analysoida tavanomaisilla regressiomenetelmillä. Gee (generalised estimating equations) on regressiotekniikka intervarioituvien suhteiden tutkimiseksi pitkittäistutkimuksissa; siinä otetaan huomioon aika sekä ajasta riippumattomat ja ajasta riippuvat kovariantit.10 Gee: n etuna tavallisiin menetelmiin verrattuna on se, että GEE käyttää kaikkia saatavilla olevia pituussuuntaisia tietoja, sallii epätasa-arvoiset määrät toistuvia mittauksia ja epätasa-arvoiset aikavälit, eikä vaadi tulosmuuttujan monimuuttujanormaalisuutta. GEE ei vaadi a priori “toimiva” korrelaatiorakenne, jotta voidaan säätää subjektin sisäinen korrelaatio toimii toistuvien mittausten malleja. Korrelaatiorakenne on valittava varsinaisen aineiston perusteella. Tässä tutkimuksessa “vaihtuva” korrelaatiorakenne sopi kaikille tulosmittareille, koska korrelaatiomatriisissa kaikki korrelaatiot eri ajankohtina olivat suunnilleen yhtä suuret (Spearmanin korrelaatiokertoimet CTX-I: lle ja CTX-II: lle erosivat välillä 0,45-0,60).

Model building

ajan vaikutus CTX-I: een ja CTX-II: een

yritimme ensin kuvata CTX-I: n ja CTX-II: n kulkua ajassa matemaattisesti tutkimalla CTX-I/CTX-II: n ja ajan välistä suhdetta ja myöhemmin lisäämällä Aika2 ja aika3 mallin istuvuuden lisäämiseksi (malli 1).

lähtötilanteen tekijät (ajasta riippumattomat)

myöhemmin selvitimme, olivatko radiologista tulosta ennustavat muuttujat (hoito, reumatekijän tila, lähtötilanteen vauriot) merkittävästi vaikuttaneet varianssin selittämiseen (malli 2).

Pitkittäistekijät (ajasta riippuvat)

lisäsimme sitten muuttujat, jotka kuvaavat kliinisesti havaittavan niveltulehduksen laajuutta malliin 3, tutkiaksemme niveltulehduksen ja CTX-I/CTX-II: n pituussuhdetta (malli 3). Tämä malli ajettiin useita kertoja, joka kerta eri muuttuja heijastava niveltulehdus.

Autoregressiivinen analyysi

lisäsimme sitten malliin 3 CTX-I/CTX-II: n tasot, jotka mitattiin yhtä aikapistettä aikaisemmin (kolme kuukautta) (CTX-It-3 kuukautta, CTX-IIt-3 kuukautta) selvittääksemme, oikeuttivatko mallissa 3 havaitut suhteet pitkittäistulkintaan.

aikaviiveanalyysi

tämä analyysi tehtiin niveltulehduksen ja CTX-I/CTX-II: n ajallisen suhteen tutkimiseksi. mallissa 4 samanaikaiset niveltulehduksen arvioinnit korvattiin niveltulehduksen arvioinneilla kolme kuukautta tai kuusi kuukautta aiemmin. Niveltulehduksen (ESR, turvonneiden nivelten lukumäärä, Arka nivelen määrä, DAS28) ja CTX-I: n tai CTX-II: n muuttujien välisiä korrelaatioita verrattiin standardoitujen regressiokertoimien avulla. Standardoitu regressiokerroin kuvaa standardoidun (normalisoidun) riippumattoman muuttujan (tässä niveltulehdusta ilmentävät muuttujat) ja riippuvaisen muuttujan (tässä CTX-I tai CTX-II) suhdetta, ja sitä voidaan käyttää eri riippumattomien muuttujien ja yhden riippuvaisen muuttujan painokorrelaatioihin.